WM-Leader Brad Binder sorgte im dritten Moto3-Training von Mugello für eine Schrecksekunde, als er auf den Curbs heftig stürzte und mitten auf die Strecke geschleudert wurde. Der Südafrikaner hatte Glück, dass er auf der Strecke liegend nicht von einem seiner Mitstreiter erfasst wurde. Binder konnte den Unfallort selbstständig verlassen, doch seine KTM wurde schwer in Mitleidenschaft gezogen. Andrea Migno ging 15 Minuten vor Schluss zu Boden, während Mahindra-Pilot Francesco Bagnaia die Zeitenliste anführte. Kurz darauf preschte Enea Bastianini auf Platz 1. Kurz vor Schluss schoss Gabriel Rodrigo aus dem RBA-Team an die Spitze, doch er wurde von Honda-Fahrer Niccolò Antonelli verdrängt. Am Ende lag Antonelli mit 1:57,789 min an der Spitze. Rodrigo büßte als Zweiter nur 0,032 sec ein. Dahinter folgten Romano Fenati (KTM), Juanfran Guevara (KTM) und Mahindra-Pilot Francesco Bagnaia. Öttl-Ersatzmann Lorenzo Dalla Porta erreichte Platz 12 mit 0,5 sec Rückstand.